lunes, 11 de marzo de 2013

ELS LLEVATS EN LA INDÚSTRIA: UTILITATS I APLICACIONS

ELS LLEVATS EN LA INDÚSTRIA: UTILITATS I APLICACIONS
Introducció

L’ésser humà a utilitzat els llevats des del 7000 a.C sense saber perquè succeïen certes coses com la fermentació del pa o la producció de bombolles en les ampolles.
A partir del gran increment de població de finals del segle XVlll es va veure la necessitat  d’industrialitzar certs processos com la producció de pa, sorgeix així una de les primeres empreses panificadores  que va originar-se a Holanda al 1780. Moments després van aparèixer altres empreses donant molta més importància a processos de producció més industrialitzats  en quantitat i deixant apart els processos que es formaven en petits locals amb quantitats limitades.
A partir del boom de la industrialització al segle XlX gairebé tots els processos en els quals intervenen llevats es duien a terme en grans empreses amb processos industrialitzats. És el naixement dels llevats en la indústria.


Utilització de llevats

En la industria alimentaria els llevats són utilitzats principalment per a fer pa i begudes alcohòliques degut a la seva capacitat per fermentar els sucres i transformar-los generalment en diòxid de carboni i etanol (figura 1).

Producció del pa: es barregen llevats amb la massa del pa i quan aquesta comença la seva fermentació, produeix diòxid de carboni que “infla” el pa i li dona la textura esponjosa que té. En aquest cas també es produeix etanol però aquest és evaporat posteriorment durant la cocció.

Producció de begudes alcohòliques: en el cas de les begudes alcohòliques s'aprofita l'etanol per aportar el component etílic. En molts casos també s'aprofita la producció de gas per carbonatar l'aigua. Les begudes alcohòliques més importants produïdes amb llevats són: el vi, la cervesa, la sidra, el sake i els destil·lats. Cada espècie de llevat fermenta els sucres de diferents maneres de tal manera que s'utilitzen diverses espècies de llevats per elaborar diferents begudes alcohòliques. Els llevats amb el seu metabolisme poden arribar a produir una concentració al voltant de 15º en el medi on es troben, les begudes alcohòliques que presentin més d’aquesta graduació han sofert altres processos químics com la destil·lació.



                    Figura 1: Esquema de la fermentació alcohòlica.

En la industria farmacèutica també son utilitzats per a la producció d'alcohol farmacològic, fàrmacs, vitamines, etc. El seu genoma és fàcil de manipular i el seu caràcter ubiqüista els fa perfectes per a créixer en qualsevol medi tenint un alt rendiment.
Els llevats també s’utilitzen per fer biocombustibles.  partir de l’extracció dels sucres del blat de moro els llevats fermenten i formen alcohol que serveix com a combustible.

Els processos anomenats de primera generació, els primers que es van instal·lar i que actualment funcionen a escala industrial, es basen en la fermentació de la glucosa a etanol mitjançant llevats com els del gènere Saccharomyces.
Les dues begudes alcohòliques per excel·lència a nivell mundial i a la península son la cervesa i el vi.
Per a la producció de cervesa existeixen tres tipus de fermentacions, la fermentació elevada que dona la varietat de cervesa “Ale” que es forma a una temperatura de 15ºC a 20ºC, poques vegades superiors a 24ºC. La fermentació baixa que dona la varietat de cervesa “Lager”. I la fermentació espontània que dona la varietat “Lambic”, aquesta fermentació la desenvolupen llevats salvatges presents als riu Zenne a Brusseles.
La producció de cervesa consisteix en introduir els llevats al suc format per la civada, la malta i el llúpol, es fa bullir tota la barreja de cereals e ingredients i posteriorment s’introdueixen els llevats per a fermentar el suc format i donar la cervesa. (figura 2)


Figura 2: Esquema de la producció de cervesa



Per a la producció del vi, es fa fermentar el suc de raïm o most, depenent del tipus de vi que es vol obtenir s’escolleixen uns derivats o altres i sofreixen una, dues o fins a tres fermentacions successives. (Figura 3)


     Figura 3: Esquema de la producció de vi.


Producció de llevats

La fabricació de llevats es fa a partir d'una única cèl·lula la qual s'alimenta perquè creixi i es multipliqui. El procés comença al laboratori amb la inoculació i posteriorment s’envia a la les sales de cultiu. En les sales de cultiu els llevats es posen dins d’uns biorreactors de fermentació els quals s'omplen constantment d'una pasta que conte extractes de canya o remolatxa, compostos nitrogenats i aire amb la finalitat d'aportar oxigen necessari per el seu desenvolupament i reproducció. La gran majoria de llevats són mesòfils i es poden incubar a temperatura ambient. El cultiu es troba barrejat amb un líquid format per residus del seu metabolisme i nutrients del qual s'ha estat alimentant el llevat. Un cop acabat el procés de creixement del cultiu, els llevats son separats d'aquest líquid mitjançant centrifugats. El producte obtingut es premsa i es talla per empaquetar-lo. També es pot dessecar o liofilitzar abans d’empaquetar-lo per tal de que es conservi més temps (figura 4).

Hi ha dos tipus principals de llevats per fer pa que es produeixen mundialment:

· Llevats frescos: Contenen un 70% d'aigua i la seva duració es                 d'aproximadament d'1 mes.

· Llevats secs:
  •  Instantanis: Els llevats secs instantanis contenen un 5% d'aigua, tenen una duració de 24 mesos i es poden addicionar directament a la farina.
  • Tradicionals: En canvi els llevats secs tradicionals contenen un 8% d'aigua, tenen una durada de 12 mesos i han de ser dissolts en aigua abans de fer-los servir. 


                        Figura 4: Esquema producció dels llevats.



Els llevats es poden cultivar en medis d’agar i brous nutritius de malta, d’extracte de llevats o sucs de fruites. El pH del medi on es cultiven a de ser entre 4,5 i 5,5 per evitar contaminacions, sobretot amb bacteris.


Especies més utilitzades:

Taula 1: Taula d’algunes espècies de llevats i la seva utilització en la industria.

ESPÈCIES DE LLEVATS
UTILITZACIÓ EN INDUSTRIA
Saccharomyces cerevisiae
Panificació, vi, cervesa, licors, sake, etc. Producció d’etanol. Elaboració d’elements nutricionals, vitamines, etc. Producció de biocombustible.
Saccharomyces ellipsoideus
Vi.
Saccharomyces uvarum
Cervesa.
Saccharomyces bayanus
Vi amb bombolles.
Saccharomyces fragilis
Aliments, suplements dels animals i producció d’etanol.
Candida utilis
Producció alcohol, proteïna unicel·lular.
Candida milleri
Pa àcid.
Candida lipolytica
Font de proteïnes.
Saccharomycopsis fibuligera

Proteïna unicel·lular, alcohol, glucoamilasa, bioquímics.
Yarrowia lipolytica
Proteïna unicel·lular, lipasa, bioquímics.
Kluyveromyces marxianus
Proteïna unicel·lular, alcohol.
Phaffia rhodozyma
Brettanomyces sp.
Proteïna unicel·lular per  a les piscifactories.
Fermentació cerveses “làmbiques”
Schizosaccharomyces sp.
Producció d’alcohol industrial.
Torulopsis utilis
Font de proteïnes.
Kloeckera apiculata
Vi.
Zygosaccharomyces mellis
Mel d’abelles.
Debaromyces kloeckera
Salsitxes.


Saccharomyces cerevisiae

El llevat per excel·lència o llevat model és Saccharomyces cerevisiae, un llevat esfèric utilitzat per la fermentació del pa i diferents begudes alcohòliques. Des del 1996 es coneix el seu genoma complet (Goffeau et al., 1996) i actualment és l'eucariota que mes es coneix en tots els seus aspectes, presenta 12 milions de bases parells al seu genoma i uns 6000 gens dels quals es coneixen pràcticament tots. Al 2002 es va descobrir també tot el genoma de Schizosaccharomyces pombe

Saccharomyces cerevisiae és el llevat més utilitzat en la industria degut a la seva alta productivitat tant en un medi aerobic com anaerobic. El fet de que pugui fermentar els sucres en diferents condicions d'aerobiosi fa que es pugui utilitzar en més processos que altres llevats.



Conclusions

Els llevats han esdevingut una eina molt important per a la industria degut a la seva capacitat per metabolitzar els sucres en etanol i la seva gran simplicitat encara que son organismes eucariotes. El seu caràcter ubiqüista i mesòfil els fa molt fàcils de cultivar i mantenir.

En resum els llevats s’utilitzen per a la producció de pa, formatges, begudes alcohòliques, etc. Actualment, i gràcies a els avenços en enginyeria genètica, també s’utilitzen per a produir productes cada vegada més diversos.


Bibliografia

Gòdia, F. i Solà, C. (2007) “Bioprocessos industrials. Biocombustibles” a Les biotecnologies. Vol.58.
Consultat el 12 d’abril de 2013.

Uso de levaduras Industriales. Dr. Luis C. Damas Buenrostro. Consultat el 15 d’abril de 2013.

García, V. (2004) Introducción a la microbiología. Costa Rica: EUNED

Consultat el dia 12 d’abril de 2013.

Consultat el dia 12 d’abril de 2013.

Consultat el dia 12 d’abril de 2013.

Consultat el dia 12 d’abril de 2013.

Consultat el dia 12 d’abril de 2013.
Consultat el dia 12 d’abril de 2013.

Consultat el dia 12 d’abril de 2013.



Autors: Ferran Fontdecaba, Juan González, Júlia Lucena.

Fixació del Nitrogen


FIXACIÓ DEL NITROGEN

Cicle del nitrogen


El nitrogen és un element molt important per a la biosíntesi de aminoàcids, àcids nucleics, i també és un dels components majoritaris de la clorofil·la... per això és molt important que els microorganismes el puguin incorporar. La incorporació del nitrogen al cicle del nitrogen comença per la fixació d’aquest.
Els bacteris juguen un paper molt important en el cicle del nitrogen, ja que fan possible la fixació del nitrogen per a que posteriorment les plantes el puguin incorporar per les arrels. Un cop introduït el nitrogen a les plantes, ja podrà ser assimilat pels animals quan consumeixen aquestes plantes.
Els bacteris capten el nitrogen atmosfèric (N2) i el converteixen en altres formes ionitzades com poden ser els ions amoni i nitrat. Aquestes formes ionitzades són captades per les arrels de les plantes i incorporades al seu metabolisme per a formar aminoàcids, àcids nucleics... També hi ha casos de mutualisme, on a les arrels de les plantes hi ha microorganismes que s’encarreguen de la fixació d’aquest nitrogen, i la planta el pot aprofitar.

Regulació


La fixació biològica del nitrogen la realitzen com s’ha dit anteriorment, els bacteris. Aquesta fixació està catalitzada per un enzim anomenat nitrogenasa.
El complex nitrogenasa és un enzim que utilitzen els bacteris que fixen nitrogen, on la funció de l’enzim és trancar els enllaços del nitrogen molecular, per a poder arribar a formar l’ió amoni (NH4+), que aquest ja podrà ser incorporat per les plantes. La reacció catalitzada pel complex nitrogenasa és la següent

N2 + 16ATP + 8e- + 10H+ = 2NH4+ + H2 + 16ADP + 16Pi

Aquesta reacció requereix un subministrament energètic molt important, perquè el triple enllaç del nitrogen atmosfèric és molt estable.

Aquest complex nitrogenasa està compost per dues subunitats, que juntes tenen capacitat catalítica. Aquestes dues subunitats proteiques són la proteïna Fe i la proteïna Mo-Fe.

-       Proteïna Mo-Fe o dinitrogenasa (complex I): Té un cofactor de Fe i Molibdè que forma part del centre actiu.
-       Proteïna Fe o reductasa (complex II): Conté àtoms de Fe units a S.

Aquesta reacció de s’inicia quan els electrons necessaris per a dur a terme la reducció del nitrogen arriben al complex II per mitjà d’una ferrodoxina. Aquests electrons redueixen el complex II, i amb l’aportació d’ATP, la proteïna Fe o complex II canvia de conformació. Aquest canvi de la conformació, amb aport energètic, permet que el complex II quedi unit al complex I. Hi ha un flux d’electrons del complex II al complex I, i posteriorment, amb hidròlisi d’ATP, les dues subunitats es desenganxen. Per tant, els electrons per a poder reduir el nitrogen ara estan al complex I, i serà aquest complex el que farà possible la reducció del nitrogen atmosfèric a l’ió amoni.


Imatge 1: Cicle del complex nitrogenasa

  
La regulació del complex nitrogenasa es pot dur a terme a diferents nivells. Començarem explicant la regulació a nivell gènic, utilitzant d’exemple Klebsiella pneumoniae, que és un bacteri fixador de nitrogen. El complex nitrogenasa està codificat per un seguit de gens polisitrònics, que estan regulats per la regió de Shine-Dalgarno, que es troba a la posició -54. També trobem altres punts de regulació, com pot ser la regió nitrC. Tot aquest conjunt de gens i factors de regulació, formen l’operador nifLA


Imatge 2: Complex nitrogenasa   



Quan hi ha presència de compostos nitrogenats, NtrA o el factor sigma 54 fa que el ribosoma no es pugui unir correctament a la regió Shine-Dalgarno i per tant, no hi ha transcripció. Amb absència de compostos nitrogenats, NtrB fosforila a NtrC, i això possibilita la transcripció..

Imatge 3: Explicació de la transcripcció en cas de presència o falta de compostos nitrogenats



Alhora, aquest enzim és molt sensible a l’oxigen. En presència d’oxigen, una de les subunitats de la nitrogenasa (proteïna Fe), fa que s’oxidi i no realitzi bé la seva funció. Per tant, és molt important pels procariotes fixadors de nitrogen, treballar en condicions anaeròbies o mantenint una taxa d’oxigen molt baixa. Alguns cianobacteris eviten el contacte amb l’oxigen utilitzant cèl·lules no fotosintètiques anomenades heterocist.

Un altre factor que altera l’activitat de la nitrogenasa és la temperatura. Un augment de la temperatura també implica un augment de l’activitat de la nitrogenasa, ja que la cèl·lula pot mobilitzar més carbohidrats per a realitzar l’activitat nitrogenasa, tot i que un augment molt notable de la temperatura, faria desnaturalitzar l’enzim i per tant, perdria funcionalitat. Per tant la temperatura donaria una regulació positiva.

Possibilitats de millora


La millora de fixació de Nitrogen és vital per una major eficiència en diversos camps. Dos dels més rellevants poden ser el camp agrícola, ja que el nostre objectiu és aconseguir una major velocitat de creixement dels organismes vegetals que cultivem, i l’ambiental, per mantenir uns nivells de fixació de nitrogen regulats, ja que això pot comportar diversos catàstrofes o desequilibris en el medi.

En el sòl, un gran nombre de bacteris pot realitzar la fixació de nitrogen, però el seu rendiment es molt poc eficient ja que el seu objectiu principal és la supervivència, i per tant altres processos com poden ser la biosíntesi a partir del Nitrogen queden en un paper secundari.

Per augmentar el rendiment de la fixació del nitrogen, els bacteris tendeixen a fer una simbiosi amb altres microorganismes o fins i tot organismes vegetals, essent un punt important en el camp agrònom, que permetria obtenir més fàcilment el Nitrogen a les plantes. Un exemple seria el cas de  la simbiosi Rhizobium-lleguminosa per tal d’enriquir el sòl: Els rizhobia són bacteris que penetren a les arrels de les plantes i formen nòduls amb les plantes, realitzant una simbiosi que permet una major eficiència i obtenció de nitrogen. Un cop la planta ha obtingut una gran quantitat de Nitrogen, s’enterra al sòl perquè aquest s’enriqueixi d’aquest compost.

Imatge 4: Simbiosi Rhizobium-lleguminosa


El problema que presenta aquesta simbiosi és que els bacteris Rhizobium necessiten un medi determinat per poder sobreviure. Un pH inadequat, la falta d’aigua o un excés de sal en el medi són un dels molts problemes que ens podem trobar. A més a més, la simbiosi entre el Rhizobium-lleguminosa hi ha diversos problemes com podria ser la diferencia d’eficiència entre les diferents espècies de la família Rhizobium.

En el medi, un augment de Nitrogen pot comportar problemes com  l’eutrofització, que és un augment de nutrients en el sistema. Això provoca que hi hagi un excés de biomassa en el medi i provoca la putrefacció d’aquest, contaminant el medi.

Solucions possibles per millora l’eficiència i el control del nitrogen

Per augmentar la nitrificació del sòl, unes condicions òptimes dels bacteris són vitals per tenir un augment de fixació del Nitrogen, Sobretot en la temperatura, com es demostra a l'estudi de l'anex 1.

Per evitat la eutrofització, el que em de fer es evitar una contaminació dels rius per un excés de nitrogen. Per tant, el que podríem fer per evitar el descontrol seria tractament de les aigües residuals en depuradores, utilitzar amb més cura els fertilitzants rics en nitrogen o emmagatzemar adequadament els residus dels conreus.


En el camp agrari, per millorar el tema de la fixació i així evitar contaminació, el que podríem canviar genèticament els microorganismes, per tal de que necessitin una major fixació de Nitrogen per obtenir la mateixa energia


Ferran Lozano
Marc Montero
Ferran Morató 

Bibliografia


Sistema de Información agrícola Nacional. INIA. Consultat el dia 5 de març del 2013 http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_ci/Agronomia%20Tropical/at4502/arti/skwierinski_r.htm
Fitonutrición. Consultada el dia 5 de març del 2013 http://fitonutricion.awardspace.biz/contenido/07-03.html
Ciceana. Consultada el dia 5 de març de 2013  http://www.ciceana.org.mx/recursos/ciclo%20del%20nitrogeno.pdf
Estación experimental del Zaidín.  CSIC. Consultada el dia 4 de març de 2013 http://www.eez.csic.es/~olivares/ciencia/fijacion/
Biogenmol. David Talens. Consultada el dia 3 de març del 2013 http://biogenmol.blogspot.com.es/2009/02/la-nitrogenasa-y-su-papel-en-las.html
Escuela de Ingeniería de Antioquia. Consultada el dia 3 de març del 2013 http://fluidos.eia.edu.co/hidraulica/articuloses/interesantes/impacto/euroficacion.htm